動物免疫（宿主動物可提供兔、羊、雞、小鼠）

設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案

客戶有特殊需求，需提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求

2-3工作日

免疫實(shí)驗(yàn)動物

分為三到四次免疫，Elisa檢測即時(shí)效價(jià)

6-12周

微測Elisa檢測

以免疫原為抗原樣品，保證Elisa檢測效價(jià)1：10000以上

1周

客戶檢測

自行設(shè)計(jì)檢測方案

1周

合格，抗體及技術(shù)服務(wù)報(bào)告交付客戶；不合格，服務(wù)停止；

第一階段：免疫小鼠

設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案

客戶有特殊需求，需提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求

2工作日

免疫實(shí)驗(yàn)動物

5只6-8周齡BALB/C小鼠，Elisa檢測即時(shí)效價(jià)

7-8周

Elisa檢測

以免疫原為抗原樣品，保證Elisa檢測效價(jià)1：10000以上

1周

第二階段：單克隆雜交瘤細(xì)胞株的建立

細(xì)胞融合

取小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選陽性克隆

2-3周

克隆擴(kuò)增和初選

擴(kuò)增并低溫保存一個(gè)成功融合的產(chǎn)物

1周

亞克隆

有限稀釋法亞克隆至形成穩(wěn)定的單克隆融合細(xì)胞株

4-6周

抗體鑒定（依據(jù)訂單要求）

測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應(yīng)性及抗體配對參數(shù)

1-4周

腹水制備/轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)

依據(jù)客戶要求，提供不同種類服務(wù)

4-6周

抗體純化

利用Protein A親和純化

1周

第三階段：單克隆雜交瘤細(xì)胞株的驗(yàn)收

提供的雜交瘤培養(yǎng)物的腹水（或上清液）與顧客方提供的抗原樣品有特異性結(jié)合，同時(shí)抗體特異性只針對客戶方提供的抗原樣品做出保證

第四階段：單克隆雜交瘤細(xì)胞株的交付

2-3株雜交瘤細(xì)胞株和少量腹水（或上清液），需要純化的訂單會依據(jù)訂單要求提供純化后抗體，并給出相應(yīng)的鑒定報(bào)告（包括單抗的亞型）

抗原親和純化

使用抗原偶聯(lián)Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱，僅捕獲針對抗原的特異性抗體，純化得到的抗體產(chǎn)物純度高到90%以上，特異性強(qiáng)、靈敏度高，能明顯減低背景信噪干擾，是抗體純化中最佳的實(shí)驗(yàn)方法之一

1-2周

Protein A/G純化

特異性的捕獲樣品中的IgG，性價(jià)比較高，特別適用于大規(guī)模樣品的純化

1-2周

飽和硫酸銨沉淀法純化

分離所有的免疫球蛋白，得率最高，但特異性和靈敏度偏低，僅適用于定性分析

1周