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一、飼料行業(yè)霉菌毒素污染概述
養(yǎng)殖行業(yè)的源頭在飼料,飼料質(zhì)量的好壞直接影響乳品的優(yōu)劣,因此需從源頭上加以控制。飼料中最主要的污染物來自霉菌毒素,不僅會通過的新陳代新帶入生乳中,產(chǎn)生所謂的“毒奶”,更要的是霉菌毒素會危害奶牛的健康并嚴(yán)重影響產(chǎn)奶水平,造成隱形的重大經(jīng)濟損失。
霉菌毒素(mycotoxins)是某些真菌在污染的糧食和谷物的生長繁殖過程中,產(chǎn)生的具有毒害作用的次級代謝產(chǎn)物,由其引起的中毒癥狀被稱作是霉菌毒素中毒癥狀(mycotoxicoses)。目前,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)霉菌毒素的種類達(dá)400多種,其化學(xué)、生物學(xué)和毒理學(xué)性質(zhì)多種多樣,主要的毒性作用包括致癌作用、遺傳毒性、致畸作用、肝細(xì)胞毒性、中毒性腎損害、生殖紊亂和免疫抑制。霉菌毒素的存在不僅給人類及牲畜的健康帶來極大的危害,也造成了相應(yīng)的經(jīng)濟損失。據(jù)聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織(Food and Agriculture Organization of the United Nations,FAO)統(tǒng)計,全球每年約有25%的農(nóng)作物被霉菌毒素污染,約2%的農(nóng)作物因污染嚴(yán)重而失去營養(yǎng)和經(jīng)濟價值,造成數(shù)千億美元的經(jīng)濟損失。
二、現(xiàn)有檢測方法比較
目前霉菌毒素的檢測方法主要分為兩大類:即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備,如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等;快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。
結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點,但是儀器設(shè)備價格昂貴,前處理過程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低,成本極高,因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測,一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測卡是企業(yè)常用的快速檢測方法,但也均存在各自的優(yōu)缺點:ELISA 方法能靈敏度相對較高,且能定量檢測,但操作過程相對復(fù)雜,對環(huán)境和人員要求高,環(huán)境干擾因素復(fù)雜,重復(fù)性較差;膠體金檢測卡可以滿足現(xiàn)場快速的要求,能在5-10min內(nèi)快速測定,但是只能定性,且靈敏度較低,肉眼觀察主觀性較強,重復(fù)性差。
三、上海飛測霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng)
上海飛測生物基于熒光定量FPOCT?快速檢測技術(shù)平臺,率先推出了飼料中真菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測系統(tǒng),包含快速檢測儀和熒光定量快速檢測/卡試紙條,可在8min內(nèi)快速準(zhǔn)確定量的測定出飼料原料及配合飼料中的各種霉菌毒素的含量,樣品前處理簡單(僅需7min),操作簡便,只需一步加樣,無需標(biāo)準(zhǔn)品,無需做標(biāo)準(zhǔn)曲線,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場打印,準(zhǔn)確性高度符合HPLC法的檢測結(jié)果,為飼料質(zhì)量安全的快速檢測和控制提供了一種全新的技術(shù)手段,適用于各類飼料加工企業(yè)、養(yǎng)殖企業(yè)、第三方檢測機構(gòu)及政府相關(guān)監(jiān)管部門。
3.1.檢測原理
當(dāng)將樣品滴加在加樣區(qū)時,樣品中的待測物與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合并通過毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測區(qū)后,檢測線T線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合,檢測線T線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記抗體的量與樣品中待測物的量成反比,質(zhì)控線C線結(jié)合的熒光標(biāo)記物樣品中待測物的量無關(guān),其它熒光標(biāo)記物繼續(xù)層析達(dá)到吸收區(qū)。層析結(jié)束后,采用熒光讀數(shù)儀的讀取T線和C線的熒光強度并計算T/C值,通過儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出樣品中待測物的含量。
3.2 時間分辨熒光納米微球標(biāo)記技術(shù)
采用聚苯乙烯納米微球?qū)ο⊥翢晒怆x子銪進(jìn)行包裹,通過熒光預(yù)增強技術(shù),提升單個熒光離子的熒光強度。通過對包裹技術(shù)的優(yōu)化和改良,納米微球中銪離子的密度可提升到10萬個/微球,包裹完熒光離子后,在微球表面再進(jìn)行葡聚糖修飾,大大提升了微球的穩(wěn)定性和對可逆環(huán)境的抗干擾性。在此基礎(chǔ)上可開發(fā)出的熒光定量免疫層析技術(shù)靈敏度高于膠體金、有色乳膠和普通熒光免疫層析方法1-3個數(shù)量級,穩(wěn)定性和精密度更好,線性范圍更寬。
3.3雙T線定量檢測技術(shù)
目前,普通免疫層析快檢產(chǎn)品通常采用單檢測線(T線)定量方法,產(chǎn)品研發(fā)周期更短,生產(chǎn)工藝更為簡單,成本也更低,但檢測結(jié)果的精密度難以控制,導(dǎo)致結(jié)果的重復(fù)性較差。我們在單T線的基礎(chǔ)上,增加了一條矯正T線,與質(zhì)控線(C線)一起,形成“雙保險”,大大提升了檢測結(jié)果的精密度和重復(fù)性。
3.4霉菌毒素快速檢測儀和快檢箱
上海飛測生物針對不同領(lǐng)域檢測項目、使用場景和功能需求,已陸續(xù)推出了多款不同型號的FD系列熒光免疫快速檢測儀,滿足食品安全領(lǐng)域快速定量檢測的需要。儀器采用高效的激發(fā)和接收光學(xué)系統(tǒng)、精密控制算法和數(shù)據(jù)處理算法,實現(xiàn)了儀器的小型化、便攜化、智能化和網(wǎng)絡(luò)化,整個讀數(shù)過程僅需5s即可完成,通過二維碼掃描功能實現(xiàn)檢測樣本信息的自動讀取;通過內(nèi)置定量技術(shù),自動計算檢測結(jié)果。檢測結(jié)果可現(xiàn)場打印,也可通過GPRS實時傳送到溯源管理云平臺,實現(xiàn)檢測結(jié)果的自動分析、全過程質(zhì)量控制、檢測數(shù)據(jù)共享、溯源管理、大數(shù)據(jù)分析等功能,實現(xiàn)對食品安全的實時監(jiān)測和管理。
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