一、 糧油谷物飼料中霉菌毒素污染情況
霉菌毒素是由產(chǎn)毒真菌在適宜的環(huán)境條件下產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物．根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織資料，世界上約有25%的谷物不同程度地受到霉菌毒素的污染而不能食用，不僅給經(jīng)濟(jì)上造成了巨大損失，而且由真菌產(chǎn)生的霉菌毒素還能引起人畜中毒，嚴(yán)重時(shí)甚至可以引起致癌。
目前已知能產(chǎn)生霉菌毒素的真菌有150余種，產(chǎn)生的霉菌毒素約有300種，其中包括了黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮及其衍生物類毒素、嘔吐毒素、伏馬菌素、T2毒素等。真菌的生長(zhǎng)和繁殖都需要一定的溫、濕度條件，最適宜生長(zhǎng)溫度一般為20～30℃，霉菌繁殖產(chǎn)毒的最適溫度為25～30℃。其中曲霉菌屬最適宜生長(zhǎng)溫度為30℃左右，青霉菌屬為25℃左右，鐮刀菌屬一般為25℃左右。當(dāng)真菌處于干燥、低溫或處于與其他真菌競(jìng)爭(zhēng)的應(yīng)激情況時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生霉菌毒素，由于真菌生長(zhǎng)有一定的地域性，因此，不同區(qū)域占優(yōu)勢(shì)的霉菌毒素種類也不同，如在亞熱帶和熱帶地區(qū)，農(nóng)產(chǎn)品和飼料主要被黃曲霉素和某些赭曲毒素污染;而玉米赤霉烯酮、嘔吐霉素、赭曲霉毒素A、T-2毒素、煙曲霉毒素則在溫帶地區(qū)占有顯著優(yōu)勢(shì)。
據(jù)我國(guó)糧油谷物飼料霉變情況調(diào)查報(bào)告，真菌的檢出率和含量，南方地區(qū)都大大高于北方地區(qū)，特別是5～9月份，南方地區(qū)的平均氣溫都處于20℃以上，平均相對(duì)濕度在80%以上，這種高溫高濕的環(huán)境條件下，真菌生長(zhǎng)繁殖最為旺盛，谷物飼料霉變大多發(fā)生在這個(gè)季節(jié);北方的夏季雖然溫度較高，但相對(duì)濕度較低，不易霉變，但常因加工、運(yùn)輸或貯存不當(dāng)而產(chǎn)生霉菌毒素。
目前霉菌毒素的檢測(cè)方法主要分為兩大類：即確認(rèn)方法和快速方法。確認(rèn)方法主要基于理化儀器設(shè)備，如薄層色譜法(TLC)、氣相色譜法(GC)、高壓液相色譜法(HPLC)和各種聯(lián)用技術(shù)如氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、液質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)等；快速方法主要是基于免疫化學(xué)基礎(chǔ)上的免疫分析方法如免疫親合柱-熒光檢測(cè)(IAC-FLD)、酶聯(lián)免疫吸附法(ELlSA)和膠體金免疫層析法等。
結(jié)果準(zhǔn)確、法定認(rèn)可是理化方法最大的優(yōu)點(diǎn)，但是儀器設(shè)備價(jià)格昂貴，前處理過(guò)程復(fù)雜、操作繁瑣、效率低，成本極高，因此不適用于大規(guī)模樣本的篩查和日常的內(nèi)控檢測(cè)，一般僅用于最終的確證。酶聯(lián)免疫吸附法ELISA 方法和膠體金快速檢測(cè)卡是企業(yè)常用的快速檢測(cè)方法，但也均存在各自的優(yōu)缺點(diǎn)：ELISA 方法能靈敏度相對(duì)較高，且能定量檢測(cè)，但操作過(guò)程相對(duì)復(fù)雜，對(duì)環(huán)境和人員要求高，環(huán)境干擾因素復(fù)雜，重復(fù)性較差；膠體金檢測(cè)卡可以滿足現(xiàn)場(chǎng)快速的要求，能在5-10min內(nèi)快速測(cè)定，但是只能定性，且靈敏度較低，肉眼觀察主觀性較強(qiáng)，重復(fù)性差。
二、 霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)
2.1糧油谷物等食品中霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)
2.2飼料及原料中霉菌毒素限量標(biāo)準(zhǔn)
三、 上海飛測(cè)糧油谷物飼料中霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)-10min準(zhǔn)確定量測(cè)定
上海飛測(cè)生物基于全球領(lǐng)先的熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái)，開(kāi)發(fā)了霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)，該系統(tǒng)結(jié)合了膠體金快速、酶聯(lián)免疫定量以及色譜法準(zhǔn)確的特點(diǎn)，可在10min內(nèi)快速準(zhǔn)確定量的測(cè)定出糧油谷物飼料中的霉菌毒素，包括黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等含量，樣品前處理簡(jiǎn)單（僅需8min），六種毒素一次提取即可，操作簡(jiǎn)便，只需一步加樣，無(wú)需標(biāo)準(zhǔn)品，無(wú)需做標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場(chǎng)打印，準(zhǔn)確性高度符合HPLC法的檢測(cè)結(jié)果，為霉菌毒素的快速檢測(cè)和控制提供了一種全新的技術(shù)手段，適用于各類原料收儲(chǔ)、糧油加工企業(yè)、飼料加工企業(yè)、第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)及政府相關(guān)監(jiān)管部門(mén)。
3.1. 熒光定量FPOCT檢測(cè)原理
當(dāng)將樣品滴加在加樣區(qū)時(shí)，樣品中的待測(cè)物與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合并通過(guò)毛細(xì)作用向前層析，當(dāng)達(dá)到檢測(cè)區(qū)后，檢測(cè)線T線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合，檢測(cè)線T線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記抗體的量與樣品中待測(cè)物的量成反比，質(zhì)控線C線結(jié)合的熒光標(biāo)記物樣品中待測(cè)物的量無(wú)關(guān)，其它熒光標(biāo)記物繼續(xù)層析達(dá)到吸收區(qū)。層析結(jié)束后，采用熒光讀數(shù)儀的讀取T線和C線的熒光強(qiáng)度并計(jì)算T/C值，通過(guò)儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品中待測(cè)物的含量。
3.2. 稀土元素銪的特點(diǎn)
1、稀土元素Eu的熒光強(qiáng)度比普通熒光染料高1-3個(gè)數(shù)量級(jí)，檢測(cè)靈敏度更高；
2、激發(fā)后的熒光壽命長(zhǎng)達(dá)1ms，比普通熒光染料的10-50ns長(zhǎng)得多，通過(guò)讀數(shù)儀的延遲讀數(shù)功能，消除基質(zhì)本底的干擾，檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和精確度更高；
3、激發(fā)光和發(fā)射光的Stokes 位移寬達(dá)270nm，遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于普通熒光染料的10-50nm，有效降低激發(fā)光和發(fā)射光的互相干擾，同樣可以提升檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和精確度；
4、熒光的發(fā)射峰非常尖銳，更有利于檢測(cè)儀器對(duì)熒光信號(hào)的采集和接收，提升檢測(cè)結(jié)果的可靠性；
3.3. 熒光納米微球的包裹和修飾
采用聚苯乙烯納米微球?qū)ο⊥翢晒怆x子銪進(jìn)行包裹，通過(guò)熒光預(yù)增強(qiáng)技術(shù)，提升單個(gè)熒光離子的熒光強(qiáng)度。通過(guò)對(duì)包裹技術(shù)的優(yōu)化和改良，納米微球中銪離子的密度可提升到10萬(wàn)個(gè)/微球，包裹完熒光離子后，在微球表面再進(jìn)行葡聚糖修飾，大大提升了微球的穩(wěn)定性和對(duì)可逆環(huán)境的抗干擾性。在此基礎(chǔ)上可開(kāi)發(fā)出靈敏度高于普通膠體金或有色乳膠免疫層析方法2-3個(gè)數(shù)量級(jí)的定量檢測(cè)技術(shù)。
3.4熒光納米微球的包裹和修飾熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái)的優(yōu)勢(shì)
3.5熒光定量FPOCT技術(shù)平臺(tái)與其他方法學(xué)技術(shù)性能的對(duì)比
3.6上海飛測(cè)霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)試紙條性能
3.7檢測(cè)所需配套的儀器和耗材
3.8檢測(cè)操作過(guò)程
檢測(cè)操作視頻
操作過(guò)程示意圖如下：
3.9結(jié)果判讀和輸出
所有產(chǎn)品均采用便熒光免疫定量分析儀進(jìn)行讀數(shù)，使得檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀，避免人為的誤判。
檢測(cè)結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上，同時(shí)可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測(cè)報(bào)告，另外，開(kāi)通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后，檢測(cè)相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動(dòng)上傳至“食品安全溯源管理云平臺(tái)”，便于溯源及質(zhì)量管理。
3.10上海飛測(cè)霉菌毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)系統(tǒng)優(yōu)勢(shì)
? 10min快速定量：集膠體金快速檢測(cè)、酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測(cè)的特點(diǎn)于一身，實(shí)現(xiàn)10min內(nèi)霉菌毒素的快速準(zhǔn)確定量檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果可現(xiàn)場(chǎng)打??；
? 內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線：儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，無(wú)需檢測(cè)時(shí)再做標(biāo)準(zhǔn)曲線，既節(jié)省了成本，也避免了操作人員與霉菌毒素的接觸，保護(hù)操作人員的安全；
? 隨到隨檢：對(duì)檢測(cè)樣本量無(wú)要求，既可單個(gè)或少量樣本隨到隨檢，也可大量樣本同時(shí)檢測(cè)，并可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)；
? 操作簡(jiǎn)便：一次提取即可檢測(cè)所有種類的霉菌毒素，也無(wú)需對(duì)檢測(cè)樣本進(jìn)行任何pH的調(diào)節(jié)；
? 配置要求低：對(duì)配套的儀器設(shè)備及人員要求低，操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握；
? 遠(yuǎn)程網(wǎng)絡(luò)支持：儀器可通過(guò)網(wǎng)絡(luò)自動(dòng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取、軟件升級(jí)、問(wèn)題故障診斷、質(zhì)量控制等；
? 性價(jià)比高：花膠體金試紙條的價(jià)格，獲得色譜檢測(cè)的結(jié)果，并且節(jié)省人力物力，大幅降低檢測(cè)費(fèi)用；
3.11熒光免疫定量分析儀基本參數(shù)
? 型號(hào)：FD-100
? 儀器尺寸：210mm×197mm×84mm
? 觸屏尺寸：3.5英寸
? 重量：1.4kg
? 激發(fā)光源 ：LED
? 激發(fā)光譜 中心波長(zhǎng)λ0=365nm
? 接收光譜 中心波長(zhǎng)λ1=610nm
? 接口：RS232、USB
? 打印：內(nèi)置熱敏打印機(jī)
? 數(shù)據(jù)儲(chǔ)存：≥10000條
? 檢測(cè)時(shí)間：8秒/個(gè)
? 檢測(cè)通量：450個(gè)/小時(shí)
? 臺(tái)內(nèi)精密度 CV≤0.5%（大于50%光強(qiáng)）
? 臺(tái)間精密度 CV≤1.0%（大于50%光強(qiáng)）
? 儀器信噪比：0.01%（1:10000）
? 帶一維碼、二維碼掃描參數(shù)輸入模塊
? 帶無(wú)線傳輸模塊
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