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疑似霉菌毒素污染飼料及原料樣品采集方法

時(shí)間:2016-04-21來源:飛測(cè)生物點(diǎn)擊量:

     霉菌毒素廣義上的檢測(cè),應(yīng)該包括取樣、制樣和分析三步。由于霉菌毒素的污染具有極不均勻性分布而且在農(nóng)產(chǎn)品中的存在是基于“μg/kg”水平,最終樣品的檢測(cè)值是不能完全代表最初樣品的真正含量,上海飛測(cè)生物科技有限公司真菌毒素檢測(cè)服務(wù)中心已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了對(duì)原料及成品黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬菌素、T-2毒素的抽樣檢測(cè)。霉菌毒素樣品采集方法、采集數(shù)量對(duì)檢測(cè)結(jié)果都有一系列的影響,要保證檢測(cè)結(jié)果的客觀性,因此要縮小各環(huán)節(jié)對(duì)檢測(cè)的影響,是日常分析檢測(cè)應(yīng)該注意的事項(xiàng)。
      在常規(guī)樣品采集過程中,采樣方法、采樣數(shù)量和樣品質(zhì)量直接決定檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和檢測(cè)結(jié)論的科學(xué)性。因此,對(duì)采樣人員及采樣方法、技術(shù)都有特定的要求。例如:采樣人員必須是獸醫(yī)技術(shù)人員且應(yīng)熟悉采樣器具的使用,掌握正確的采樣方法?,F(xiàn)就采樣過程中需要注意的事項(xiàng)談幾點(diǎn)自己的意見:
      1、飼料及飼料原料中含有豐富的蛋白質(zhì)、淀粉、維生素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),加之有利的霉菌生長(zhǎng)環(huán)境,則很容易滋生霉菌等微生物而引發(fā)飼料及原料的的霉變。飼料及原料霉變引起的資源的浪費(fèi)是一項(xiàng)世界性的難題,農(nóng)作物在田間、收獲、加工、存儲(chǔ)過程中極易感染霉菌。在日常生產(chǎn)過程中,對(duì)原料及成品的質(zhì)量監(jiān)控,我們沒有辦法做到全部檢測(cè),只能對(duì)其進(jìn)行抽樣檢測(cè)。檢測(cè)過程中取樣、制樣和分析3個(gè)步驟中都不可避免地存在著誤差。其中,取樣環(huán)節(jié)產(chǎn)生的誤差最大,占總誤差的85%以上,而制樣與分析2個(gè)環(huán)節(jié)共占總誤差的15%以下。在取樣過程中通常采用四分法取樣,將樣品磨粉,過篩網(wǎng),然后混合,平鋪成圓形,分成4等分,取相對(duì)的2份混合,然后再平分,減取樣約200g,粉碎過25目篩后,裝入樣品袋,貼好標(biāo)簽備用。對(duì)于水分含量較高的樣本,立即于65℃烘箱中烘干至恒重,然后按上述方法制成風(fēng)干樣本備用。
      2、樣品粉碎細(xì)度對(duì)檢測(cè)結(jié)果是否有影響?真菌毒素取樣的關(guān)鍵點(diǎn)是什么?
      樣品的粉碎其目的更重要的是將基質(zhì)混勻,以提高樣品的代表性,通常推薦粉碎細(xì)度達(dá)到75%過20目即可,但要確保樣品混合的均質(zhì)性。真菌毒素取樣的關(guān)鍵包括以下幾點(diǎn):
      1) 使用適當(dāng)?shù)娜庸ぞ撸?/span>
      2) 使用適當(dāng)?shù)娜臃绞皆趦?chǔ)存地點(diǎn)收集樣品;
      3) 適當(dāng)?shù)娜恿浚?/span>
      4) 在樣品分析前應(yīng)用紙袋或布袋儲(chǔ)存在干燥涼爽的地方,以避免微生物或霉菌的生長(zhǎng);
      5) 送至實(shí)驗(yàn)室中檢測(cè)的樣品成品至少0.5公斤;原料至少1公斤;
      6) 全部樣品粉碎后,進(jìn)行二次取樣。 
      3、外觀判定的誤導(dǎo)性
      1)即使看不見霉菌,也可能有霉菌毒素(有可能是作物在田間感染霉菌存留的霉菌毒素);
      2)不經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室的分析檢測(cè),不能正確的判定飼料及原料是否受霉菌毒素污染;
      3)不能單純的檢測(cè)飼料及原料中霉菌的含量來評(píng)判其霉菌毒素的含量;
      4)霉菌毒素作用具有協(xié)同性,通常往往飼料及原料含量多種霉菌毒素,所以在檢測(cè)的時(shí)候不能只關(guān)注黃曲霉毒素;
      5)在疑似霉菌毒素超標(biāo)的樣品,要建立正確的樣品取樣方法。
      4、在正常生產(chǎn)中由于飼料及原料產(chǎn)量大,庫(kù)存大這樣就會(huì)造成霉菌毒素檢測(cè)取樣困難的難題,不恰當(dāng)?shù)娜臃椒ㄍ荒芸陀^的反應(yīng)整體霉菌毒素污染情況。

 霉菌毒素污染樣品采樣方式
      5、樣品檢測(cè)過程中都會(huì)存在哪些誤差
      在樣品分析檢測(cè)過程中,誤差主要存在在料堆、取樣、分析這三個(gè)過程當(dāng)中,在以往的研究經(jīng)驗(yàn)和文獻(xiàn)報(bào)道中,各個(gè)環(huán)節(jié)誤差大體呈現(xiàn)以下圖表分布:
 霉菌毒素污染樣品誤差來源分析
      6、樣品分析檢測(cè)過程中的單位問題“ppb、ppm”
      在當(dāng)我們拿到樣品分析檢測(cè)報(bào)告的時(shí)候,通常霉菌毒素的單位會(huì)標(biāo)識(shí)為ppb或ppm,不是專業(yè)的負(fù)責(zé)質(zhì)量管理的工作人員,通常會(huì)不理解這個(gè)單位代表的什么意思,報(bào)告中的數(shù)值代表霉菌毒素含量是高還是低,那么現(xiàn)在就對(duì)霉菌毒素的濃度單位做一個(gè)解釋。
      1ppm=1毫克/千克=1000ppb=1000微克/千克=1克/噸
      1ppm量化來說相當(dāng)于,每一噸飼料或原料里含有霉菌毒素的量是1克。
      7、取樣的原則
      樣品選取一定要具有代表性,在對(duì)不同樣品進(jìn)行取樣時(shí),要參考相應(yīng)的推薦方法進(jìn)行樣品的選取,因?yàn)槲覀円嘈挪磺‘?dāng)?shù)娜樱?jīng)檢測(cè)得到的檢測(cè)結(jié)果一定是不恰當(dāng)?shù)?,這樣檢測(cè)所提供的信息往往是不正確的。
      經(jīng)過查閱文獻(xiàn)及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,我認(rèn)為取樣主要原則應(yīng)有一下幾個(gè)方面:
      1)取樣的時(shí)候要做到多點(diǎn)、隨機(jī)、均勻,使得每個(gè)部位都有相同的概率被取到。
      2)取樣的點(diǎn)數(shù),F(xiàn)AO和WTO建議沒200公斤物料取樣一次,如果索取樣品是比較均勻的物料,可以適當(dāng)?shù)臏p少取樣點(diǎn)數(shù),在實(shí)際工作中由于人力、物力有限,所以在實(shí)際操作中取樣點(diǎn)數(shù)應(yīng)根據(jù)企業(yè)實(shí)際情況以及物料情況來確定取樣點(diǎn)數(shù)。
      3)取樣量,原料送檢樣品取樣成品應(yīng)在500g,原料樣品應(yīng)在1000g,這樣可以保證檢測(cè)的最低檢測(cè)量和檢測(cè)樣品的霉菌毒素的分布均一性。 
      8、取樣的方法
      1)流動(dòng)物料取樣,適用于運(yùn)輸卡車、火車、輪船散裝物料卸料時(shí);筒倉(cāng)物料存儲(chǔ)取樣口取樣;飼料企業(yè)打包出料扣取樣。
      2)飼料生產(chǎn)過程取樣,在出料扣安裝自動(dòng)采樣設(shè)備或者采用鵜鶘嘴取樣器取樣。
      3)倉(cāng)儲(chǔ)飼料取樣,對(duì)已經(jīng)進(jìn)入倉(cāng)庫(kù)的飼料,按照袋裝物料的采樣程序進(jìn)行取樣。
      4)養(yǎng)殖場(chǎng)飼料及原料取樣,飼料樣品從料槽中中采樣,每個(gè)料槽采樣量在500g,料槽應(yīng)該隨機(jī)性選擇;原料樣品應(yīng)該從存儲(chǔ)袋中按照多個(gè)采樣點(diǎn)取樣,每次取樣1000g。
      9、成品料溫超標(biāo)時(shí),可從以下操作、設(shè)備方面逐個(gè)排除可能的原因。操作上可能的原因有以下幾種:
      1)制粒機(jī)喂料轉(zhuǎn)速有可能過快;
      2)制粒本身的調(diào)質(zhì)溫度過高;
      3)成品含粉率偏高影響冷卻效果;
      4)冷卻風(fēng)機(jī)還未完全轉(zhuǎn)換己將成品打入冷卻器;
      5)停機(jī)時(shí)冷卻不到位手動(dòng)排料過快;
      設(shè)備上可能的原因則有以下幾種:
      1)冷卻風(fēng)檔可能開啟得太??;
      2)冷卻風(fēng)機(jī)風(fēng)葉是否積塵嚴(yán)重、有無(wú)存在破損現(xiàn)象;
      3)冷卻器周壁、冷卻風(fēng)管破損存在跑風(fēng)現(xiàn)象;
      4)冷卻風(fēng)機(jī)存在缺相;
      5)料位器位置放置太高或太低、有無(wú)卡料現(xiàn)象;
      6)冷卻分料板分料是否均勻;
      7)排料柵欄間隙調(diào)整得過太、停止時(shí)是否會(huì)完全重疊;
      8)冷卻關(guān)風(fēng)器有無(wú)堵塞;
      9)冷卻排料時(shí)間設(shè)置得太短;
      10)冷卻器本身的產(chǎn)能功率是否與制粒主機(jī)相匹配。
      10、霉變?nèi)菀滓痫暳霞霸系膰?yán)重浪費(fèi),并同時(shí)會(huì)對(duì)畜禽的健康造成嚴(yán)重的危害,所以防霉、脫霉是飼料及養(yǎng)殖企業(yè)應(yīng)當(dāng)重視的首要問題,主要防范措施有:
      1)控制原料的含水量,用于飼料加工的原料水分含量不應(yīng)超過11.5%。
      2)飼料包裝袋做到密封性良好,飼料及原料存放倉(cāng)庫(kù)要保持干燥和通風(fēng)良好,一般霉菌孢子在7℃條件下即可萌發(fā)生長(zhǎng),在20-30攝氏度的時(shí)候迅速增殖,從濕度上講,大多數(shù)霉菌在相對(duì)濕度80%以上時(shí),生長(zhǎng)旺盛,因此在保存時(shí)要保證環(huán)境溫度小于7℃,相對(duì)濕度控制在75%以下。
      3)添加防霉劑和脫霉劑
       通常溫度環(huán)境溫度高于7℃,相對(duì)濕度控制在75%以上時(shí)就需要使用防霉劑,尤其是在溫度和濕度相對(duì)較高的季節(jié)。 
      4)建立霉菌毒素檢測(cè)計(jì)劃


      上海飛測(cè)生物飼料及原料中霉菌毒素快速定量檢測(cè)方案--10min快速定量


    上海飛測(cè)生物基于全球領(lǐng)先的熒光定量POCT技術(shù)平臺(tái),在國(guó)內(nèi)率先推出了霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條,本產(chǎn)品可在10min快速定量的檢測(cè)出大麥、小麥、面粉中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等真菌毒素的殘留含量,樣品前處理簡(jiǎn)單(僅需8min),檢測(cè)操作簡(jiǎn)便,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場(chǎng)打印,準(zhǔn)確性符合HPLC法的檢測(cè)結(jié)果,適用于各類飼料加工企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條原理圖
     上海飛測(cè)生物Femdetection?霉菌毒素系列熒光定量檢測(cè)試紙條性能

飛測(cè)生物真菌毒素系列熒光定量檢測(cè)試紙條性能

      檢測(cè)所需配備的儀器和耗材

霉菌毒素檢測(cè)試紙條所需設(shè)備及耗材

      樣品前處理過程

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條樣品前處理

      檢測(cè)操作過程

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測(cè)試紙條操作過程

      結(jié)果判讀和輸出
      所有產(chǎn)品均采用便攜式熒光免疫定量分析儀進(jìn)行讀數(shù),使得檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀,避免人為的誤判。
1、陰性(-):檢測(cè)結(jié)果<cutoff值(cutoff值可根據(jù)客戶的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)整),結(jié)果為陰性;
2、陽(yáng)性(+):檢測(cè)結(jié)果≥cutoff值(cutoff值可根據(jù)客戶的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)整),結(jié)果為陽(yáng)性;
3、 無(wú)效:讀數(shù)儀報(bào)錯(cuò),則本次檢測(cè)無(wú)效,需重新測(cè)試;
4、 檢測(cè)結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時(shí)可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測(cè)報(bào)告,另外,開通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后,檢測(cè)相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動(dòng)上傳至“食品安全溯源管理云平臺(tái)”,便于溯源及質(zhì)量管理。

霉菌毒素?zé)晒舛吭嚰垪l讀數(shù)儀
      飛測(cè)生物Femdetection?霉菌毒素系列熒光定量檢測(cè)試紙條產(chǎn)品亮點(diǎn) 
      ? 10min快速定量:集膠體金快速檢測(cè)、酶聯(lián)免疫定量檢測(cè)、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測(cè)的特點(diǎn)于一身,實(shí)現(xiàn)10min內(nèi)真菌毒素的快速準(zhǔn)確定量檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果可現(xiàn)場(chǎng)打??;
      ? 內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線:儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,無(wú)需檢測(cè)時(shí)再做標(biāo)準(zhǔn)曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與真菌毒素的接觸,保護(hù)操作人員的安全;
      ? 隨到隨檢:對(duì)檢測(cè)樣本量無(wú)要求,既可單個(gè)或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時(shí)檢測(cè),并可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè);
      ? 試劑全配:試劑盒中已配套所有試劑,無(wú)需檢測(cè)人員配制任何溶液,也無(wú)需對(duì)檢測(cè)樣本進(jìn)行任何pH的調(diào)節(jié);
      ? 配置要求低:對(duì)配套的儀器設(shè)備及人員要求低,最低儀器配置僅需1臺(tái)天平、1把100ul和1ml移液器即可,操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握;
      ? 遠(yuǎn)程網(wǎng)絡(luò)支持:儀器可通過網(wǎng)絡(luò)自動(dòng)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取、軟件升級(jí)、問題故障診斷、質(zhì)量控制等;
      ? 性價(jià)比高:花膠體金試紙條的價(jià)格,獲得色譜質(zhì)譜檢測(cè)的質(zhì)量和結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測(cè)費(fèi)用;

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